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버섯 종균의 제조 방법 작성자 유 창 현 등록일 2001-07-24 00:00:01 조회수 5,120 |
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| 첨부 #1 버섯 종균의 제조방법.pdf |
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1. 버섯균 배양용 배지제조 버섯의 종류의 따라서 배지의 종류도 각기 다르나 일반적으로 감자한천배지(PDA)가 많이 쓰여지고 있다. 감자 한천배지는 껍질을 벗긴 감자 200g을 잘게 썰어 물 1ℓ에 넣고 약한 불로 20-30분간 끓여 꺼즈등으로 거른 후 부족한 양을 물로 채운다. 이 감자 추출액 1ℓ 에 설탕20g, 한천18-20g을 넣고 다시 끓여서 한천이 완전히 녹으면 시험관에 10-15㎖씩 분주를 한 다음 솜마개나 실리콘마개를 한다. 최근에는 간단히 물에 직접 녹여서 쓸 수 있는 PDA가 판매되고 있으므로 이것을 구입하여 쓰면 편리하다. 배지를 넣은 시험관은 소형 고압 살균기에 넣어 121℃에서 20분간 살균을 하고 비스듬이 시험관을 눕혀 사면을 시킨다. 이때 솜마개의 안쪽끝에서 1-2㎝정도 떨어지게 사면을 하는 것이 좋으며, 배지가 완전히 굳으면 버섯균 증식용으로 사용한다. 2. 원균의 분리 및 배양 농가에서는 각도의 농촌진흥원이나 지도소, 또는 종균배양소를 통하여 원균을 분양받을수 있다. 또한 우량 품종을 재배하는 농가의 재배사의 버섯이나 야생버섯으로부터 조직분리를 하여도 좋다. 조직분리방법은 신선한 버섯을 채취하여 소독한 칼로 버섯의 표피를 제거한후 내부의 조직을 2-3㎜크기로 절단하여 PDA 배지에 옮기고 25℃에서 배양하면 3-5일 경부터 균사가 발생한다. 여러개의 균사중 생장이 왕성한 것을 선별하여 새로운 PDA배지에서 배양한다. 대량으로 증식을 하여 접종원을 만들때에는 유리접시(petri-dish)를 이용하거나 입구가 넓은 납작한 병에 PDA를 넣어 배양하면 편리하다. 버섯의 균사는 전체 배양기 면적의 90-95% 정도 자랐을 때 사용하여야 활력이 가장 왕성하며, 저장을 할 때는 시험관에 실리콘마개를 하거나 유산지로 솜마개를 싸서 5℃의 저온에 보관을 한다. 버섯원균의 계대배양은 3-4개월마다 앞과 같은 방법으로 하면 된다. 3. 접종원의 배양 느타리버섯이나 표고버섯에서 주로 사용하는 톱밥으로 만든 접종원의 제조방법은 종균 배양과정과 같다. 850-1000㎖의 병에 톱밥 배지를 제조한 후, 미리 배양한 시험관이나 유리접시의 균사 조각을 크게 떼어 무균실(상)에서 접종을 한다. 이것을 온도 23-25℃, 습도 70%정도의 배양실에서 25-30일 정도 배양을 하여 톱밥배지 전체에 균사가 완전히 자라면 잡균의 발생유무를 조사한 후 종균배양용 접종원으로 사용한다. 접종원의 잡균발생 검사는 배양한 접종원의 톱밥을 조금씩 떼어 시험관이나 유리접시의 PDA상에 넣고 25℃와 45℃에서 3-5일간 배양을 하며 고온성 세균등의 발생여부를 조사한다. 4. 종균배양 느타리버섯, 팽이, 버들송이 등은 포푸라톱밥에 쌀겨(미강)를 부피비율로 20%를 혼합한 후 수분을 65-70%로 조절한다. 이러한 수분함량은 톱밥을 한줌쥐고 꼭짰을 때 손가락 사이로 물방울이 2-3개 떨어지는 정도이다. 수분조절이 끝난 톱밥은 1000㎖병에 약 600-750g 씩 넣고 표면을 약간 다진 후 중앙에 직경1㎝ 정도의 구멍을 병바닥까지 뚫고 솜마개를 하고 살균을 한다. 현재 이러한 톱밥 배지의 입병 작업을 대부분이 입병기를 사용하고 있다. 종균배양은 완전 멸균이 되고 시간이 단축되는 고압살균을 주로 하고 있다. 고압살균은 톱밥배지를 살균솥(기)안에 넣고 수증기 압력을 1.2㎏/㎠으로 하며 121℃에서 60-90분간 실시한다. 이때 가장 중요한 것은 살균전과 살균중에 계속 배기를 시켜 살균기에 있는 공기가 완전히 제거되도록 하는 것이다. 살균이 끝난 것은 냉각실에서 25℃이하로 식힌 후 무균실로 옮겨 미리 배양한 접종원을 1-2스푼씩 퍼 넣고 배양을 한다. 배양실 온도는 25℃, 습도는 70%이하로 유지하며 암상태에서 배양을 하며 잡균이 발생하였거나 생장이 부진한 것은 제거를 한다. 균의 배양기간은 20-25일 정도가 소요되며, 바로 사용하지 않는 종균은 5℃ 이하에 저장을 하였다가 필요시 쓰도록 한다. |
